NIST標準物質(zhì)RM8671—人源化IgG1κ單克隆抗體

產(chǎn)品介紹

NIST標準物質(zhì)RM8671—人源化IgG1κ單克隆抗體主要用于評估測定單克隆抗體的物理化學和生物物理屬性的方法的性能。它還為開發(fā)治療性蛋白質(zhì)表征的新技術提供了一種具有代表性的測試分子。該RM可用于多種用途，包括系統(tǒng)適用性測試、建立方法或儀器性能和可變性、比較變化的分析測試方法以及協(xié)助方法鑒定。

NIST標準物質(zhì)RM8671—人源化IgG1κ單克隆抗體由一個內(nèi)螺紋聚丙烯冷凍瓶組成，該冷凍瓶在12.5 mmol/L L-組氨酸、12.5 mmol/L L-組氨酸HCl（pH 6.0）中含有800μL的10 mg/mL NIST IgG1κ單克隆抗體（NISTmAb）。

有效期：RM8671在2026年4月29日之前，未經(jīng)認證的值在規(guī)定的測量不確定度范圍內(nèi)有效。

NIST單克隆抗體（NISTmAb）是一種在小鼠懸浮培養(yǎng)物中表達的重組人源化IgG1κ，已經(jīng)過生物制藥行業(yè)標準的上游和下游純化，以去除工藝相關雜質(zhì)。它是由兩個輕鏈和兩個重鏈亞單位通過鏈間和鏈內(nèi)二硫鍵連接而成的~150kDa同源二聚體。該分子具有高豐度的N末端焦谷氨酰胺化、C末端賴氨酸剪接和重鏈的糖基化。該蛋白質(zhì)還具有低豐度的翻譯后修飾，包括蛋氨酸氧化、脫酰胺和糖基化[1-4]。這些ACS研討會系列廣泛描述了作為本文主要樣品（PS）的首批中間材料的其他產(chǎn)品質(zhì)量屬性[5-7]。

質(zhì)量濃度未認證值：

表1中列出的質(zhì)量濃度值基于280 nm處測得的十倍稀釋度D。十次衰減D計算為透射率的負對數(shù)（以10為基數(shù)），與吸光度類似，除了包含散射和發(fā)光對樣品輻射功率的影響外[14]。NISTmAb的濃度通過使用1.42 mL·mg的理論消光系數(shù)（ε）測定?1·厘米?1 [15,16]. 該值根據(jù)[16]報告的方法計算，并進一步修正為聚糖質(zhì)量分數(shù)修正系數(shù)0.977[15]。有關分析方法的詳細信息以及與質(zhì)量濃度測量相關的不確定度的影響，請參閱參考文獻[9]

物理化學非認證值：RM 8671的物理化學屬性使用合格的尺寸排除色譜法（SEC）、毛細管十二烷基硫酸鈉電泳法（CE-SDS）、毛細管區(qū)帶電泳法（CZE）和動態(tài)光散射法（DLS）進行測量[10,11]。為了建立方法性能標準，使用初級樣品（PS）對這些分析化驗進行鑒定。鑒定練習根據(jù)ICH Q2（R1）方法驗證指南進行建模，包括線性評估、檢測限（LOD）/定量限（LOQ）、范圍和精密度（重復性和一些中間精密度）。通過使用每種合格方法（SEC、CE-SDS、DLS和CZE）分析批次14HB-D-002，分配表2、3、4和5中提供的物理化學值，同時用儀器鑒定（IQ）標準和PS將每次分析括起來，以確保系統(tǒng)適用性。IQ標準和PS都需要通過由方法鑒定得出的預定義方法性能標準。有關分析方法的詳細信息以及與測量相關的不確定度的貢獻，請參閱參考文獻[9-11]。參考文獻[9-13]對物理化學測量的具體方案和結(jié)果進行了全面的擴展。

NIST標準物質(zhì)RM8671—人源化IgG1κ單克隆抗體用于研究用途。rm8671不用于動物或人類食用、臨床試驗或治療用途。一般來說，在任何實驗室操作過程中都應穿戴個人防護裝備。這包括但不限于護目鏡、手套和實驗室夾克。